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CGRP降鈣素基因相關肽

更新時間:2023/7/3

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降鈣基因相關肽放免藥盒操作說明書
                                                                                                 CGRPHY-041 RIA  KIT
 
降鈣素基因相關肽(Calcitonin gene related peptide CGRP)是近年來在人和哺乳動物體內發現的一種生物活性物質。CGRP廣泛分布于中樞和外周神經系統以及某些器官組織中,它是目前已知zui強的舒血管物質。對各系統特別是心血管系統有著重要的調節作用。
CGRP在機體病理條件下的防御和代償意義已受到高度重視。一般認為在正常生理狀態下,血漿CGRP和內皮素(ET)濃度保持相對恒定。因此,測定血漿CGRP對于研究心肌缺血、腦卒中、高血壓、體外循環、血管再通以及組織移植都具有廣闊的臨床前景。
    藥盒組成:(常溫運輸,4℃保存)
1、  緩沖液(PBS)1瓶,用時每瓶加蒸餾水至50ml   
2、PR分離劑(第二抗體)1瓶:用前充分搖勻
  3、CGRP抗體1瓶。        4、125I- CGRP 1瓶:
  5、CGRP標準品6瓶,濃度為20、60、150、300、600、1200pg/ml。
   樣品收集:
  1、血漿采集:
    取靜脈血3ml ,注入含10%EDTA.Na2  30ul和抑肽酶10ul(含100U/ml以上)的試管中混勻,4℃3000rpm/ min離心10min分離血漿,-20℃保存2個月,-70℃以下保存 半年。測定前,使樣本置于室溫或冷水中復融,混勻后,再次4℃3000rpm/ min離心5min,取上清測定。
     2、組織樣品的處理:
      取出活組織,吸去血跡,稱重,盡快放入1N HAC 1ml略做碾磨,然后在100℃水中煮沸10min,勻漿。4℃3000rpm/ min離心15min,取上清-20℃以下保存,測定時用PBS五倍以上稀釋,以調節PH值。每種組織的樣品非特異結合(U0)可能有差異,每份標本單獨做一個U0。取組織的重量一般在100mg左右為好。
    
測定方法:(非平衡法加樣)
                       CGRP    RIA加液程序        (單位: ul )
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                試   劑      T     NSB      S0   S1~S6    樣  品
             ————————————————————————————
               緩 沖 液    ——    300     200    ——      ——
               標 準 品    ——    ——    ——    200      ——
               樣    品    ——    ——    ——   ——      200
               抗    體    ——    ——     100    100      100
            ————————————————————————————
                              搖勻4℃ 放24小時                   
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              125I- CGRP    100     100     100    100       100
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                              搖勻4℃ 放24小時
            ————————————————————————————
               分 離 劑    ——     500     500    500      500     
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      混勻,室溫15分鐘, 3500 轉/分 4℃離心20分鐘,吸棄上清液,測定沉淀cpm數。
 
注:測定兔標本時,應改用功25% PEG 作分離劑,每管加500ul,NSB、S0、S1~S6管補加正
     常人血清100ul/管(或r-球蛋白100 ul/管);U、U0管加PBS 100ul/管。
   
結果計算
    以N/T、B/T計算NSB、S0結合百分率,以B/B0計算標準及待測樣品結合百分率,在半對數坐標紙上繪制標準曲線,并查出樣品值, 或由自動r計數儀預先編制程序。直接給出有關參數,標準曲線及樣品濃度。
 
注意事項:
     本月標準品每瓶用               ml緩沖液稀釋
         本月藥盒抗體每瓶用              ml緩沖液稀釋    
         本月藥盒標記每瓶用              ml緩沖液稀釋 
     本月分離劑在使用前充分混勻(不可冰凍)
 
本試劑盒主要技術指標:
1.  NSB:5%。
2.  靈敏度:<15pg/ml。
3.  標準曲線范圍:20~1200pg/ml。
4.  批內變異系數:CVw<7.0 %。
5.  批間變異系數:CVw < 12.0% 。
6.  特異性:本抗血清與內皮素(ET)、胃動素(MTL)、骨鈣素(BGP)、C端甲狀旁腺素(C-PTH)、降鈣素(CT)等多肽均無交叉反應。
7.  正常參考值:各實驗室應根據自己的條件建立自己的正常對照組。
                      50.6±24.5pg/ml(n=25)。
   
 本次藥盒參考數據:    
           ——————————————————————————————
                  T     NSB     S0          S1    S2   S  S4   S5     S6   
           ——————————————————————————————
            CPM
           ——————————————————————————————
                    N/T%        B0/T%      B/ B0 %       
           ——————————————————————————————   
 
      生產日期:
      有效日期:

FR-*-034 A 200 25800 過夜
血管緊張素Ⅱ (pg/ml
FR-*-035 Aldosterone 100 0.0625-2 過夜
醛固酮 (ng/ml
FR-*-036 ANP 100 0.0625-2 過夜
心鈉素 (ng/ml)
FR-*-037 β2-MG 50 0.210 37
β2-微球蛋白 ug/ml 1h
(寬范圍)    
FR-*-038 α1-MG 100 2-80 37
α1-微球蛋白 ug/ml 1h
FR-*-039 TXB2 200 12.5-400 過夜
血栓素B2 (pg/ml)
FR-*-040 6-Keto-PGFla 200 25-1600 過夜
6- (pg/ml)
FR-*-041 ET 200 20-1000 過夜
內皮素 (pg/ml)
FR-*-042 CGRP 200 15-1200 過夜
降鈣素基因相關肽 (pg/ml)
FR-*-043 ACTh 100 5-405 過夜
促腎上腺皮質激素 (pg/ml)

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