降鈣基因相關肽放免藥盒操作說明書 CGRP(HY-041) RIA KIT 降鈣素基因相關肽(Calcitonin gene related peptide CGRP)是近年來在人和哺乳動物體內發現的一種生物活性物質。CGRP廣泛分布于中樞和外周神經系統以及某些器官組織中,它是目前已知zui強的舒血管物質。對各系統特別是心血管系統有著重要的調節作用。 CGRP在機體病理條件下的防御和代償意義已受到高度重視。一般認為在正常生理狀態下,血漿CGRP和內皮素(ET)濃度保持相對恒定。因此,測定血漿CGRP對于研究心肌缺血、腦卒中、高血壓、體外循環、血管再通以及組織移植都具有廣闊的臨床前景。 藥盒組成:(常溫運輸,4℃保存) 1、 緩沖液(PBS)1瓶,用時每瓶加蒸餾水至50ml 2、PR分離劑(第二抗體)1瓶:用前充分搖勻 3、CGRP抗體1瓶。 4、125I- CGRP 1瓶: 5、CGRP標準品6瓶,濃度為20、60、150、300、600、1200pg/ml。 樣品收集: 1、血漿采集: 取靜脈血3ml ,注入含10%EDTA.Na2 30ul和抑肽酶10ul(含100U/ml以上)的試管中混勻,4℃3000rpm/ min離心10min分離血漿,-20℃保存2個月,-70℃以下保存 半年。測定前,使樣本置于室溫或冷水中復融,混勻后,再次4℃3000rpm/ min離心5min,取上清測定。 2、組織樣品的處理: 取出活組織,吸去血跡,稱重,盡快放入1N HAC 1ml略做碾磨,然后在100℃水中煮沸10min,勻漿。4℃3000rpm/ min離心15min,取上清-20℃以下保存,測定時用PBS五倍以上稀釋,以調節PH值。每種組織的樣品非特異結合(U0)可能有差異,每份標本單獨做一個U0。取組織的重量一般在100mg左右為好。 測定方法:(非平衡法加樣) CGRP RIA加液程序 (單位: ul ) ———————————————————————————— 試 劑 T NSB S0 S1~S6 樣 品 ———————————————————————————— 緩 沖 液 —— 300 200 —— —— 標 準 品 —— —— —— 200 —— 樣 品 —— —— —— —— 200 抗 體 —— —— 100 100 100 ———————————————————————————— 搖勻4℃ 放24小時 ———————————————————————————— 125I- CGRP 100 100 100 100 100 ———————————————————————————— 搖勻4℃ 放24小時 ———————————————————————————— 分 離 劑 —— 500 500 500 500 ———————————————————————————— 混勻,室溫15分鐘, 3500 轉/分 4℃離心20分鐘,吸棄上清液,測定沉淀cpm數。 注:測定兔標本時,應改用功25% PEG 作分離劑,每管加500ul,NSB、S0、S1~S6管補加正 常人血清100ul/管(或r-球蛋白100 ul/管);U、U0管加PBS 100ul/管。 結果計算: 以N/T、B/T計算NSB、S0結合百分率,以B/B0計算標準及待測樣品結合百分率,在半對數坐標紙上繪制標準曲線,并查出樣品值, 或由自動r計數儀預先編制程序。直接給出有關參數,標準曲線及樣品濃度。 注意事項: 本月標準品每瓶用 ml緩沖液稀釋 本月藥盒抗體每瓶用 ml緩沖液稀釋 本月藥盒標記每瓶用 ml緩沖液稀釋 本月分離劑在使用前充分混勻(不可冰凍) 本試劑盒主要技術指標: 1. NSB:5%。 2. 靈敏度:<15pg/ml。 3. 標準曲線范圍:20~1200pg/ml。 4. 批內變異系數:CVw<7.0 %。 5. 批間變異系數:CVw < 12.0% 。 6. 特異性:本抗血清與內皮素(ET)、胃動素(MTL)、骨鈣素(BGP)、C端甲狀旁腺素(C-PTH)、降鈣素(CT)等多肽均無交叉反應。 7. 正常參考值:各實驗室應根據自己的條件建立自己的正常對照組。 50.6±24.5pg/ml(n=25)。 本次藥盒參考數據: —————————————————————————————— T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5 S6 —————————————————————————————— CPM —————————————————————————————— N/T% B0/T% B/ B0 % —————————————————————————————— 生產日期: 有效日期: |
FR-*-034 | AⅡ | 200 | 25-800 | 過夜 |
血管緊張素Ⅱ | (pg/ml) | |||
FR-*-035 | Aldosterone | 100 | 0.0625-2 | 過夜 |
醛固酮 | (ng/ml) | |||
FR-*-036 | ANP | 100 | 0.0625-2 | 過夜 |
心鈉素 | (ng/ml) | |||
FR-*-037 | β2-MG | 50 | 0.2-10 | 37℃ |
β2-微球蛋白 | (ug/ml) | 1h | ||
(寬范圍) | ||||
FR-*-038 | α1-MG | 100 | 2-80 | 37℃ |
α1-微球蛋白 | (ug/ml) | 1h | ||
FR-*-039 | TXB2 | 200 | 12.5-400 | 過夜 |
血栓素B2 | (pg/ml) | |||
FR-*-040 | 6-Keto-PGFla | 200 | 25-1600 | 過夜 |
6-酮 | (pg/ml) | |||
FR-*-041 | ET | 200 | 20-1000 | 過夜 |
內皮素 | (pg/ml) | |||
FR-*-042 | CGRP | 200 | 15-1200 | 過夜 |
降鈣素基因相關肽 | (pg/ml) | |||
FR-*-043 | ACTh | 100 | 5-405 | 過夜 |
促腎上腺皮質激素 | (pg/ml) |