ELISA試劑盒是以免疫學反應為基礎,將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的催化作用相結合起來的一種敏感性很高的試驗技術。在實際應用中,通過不同的設計,具體的方法步驟可有多種。即:用于檢測抗體的間接法、用于檢測抗原的雙抗體夾心法以及用于檢測小分子抗原或半抗原的抗原競爭法等等。比較常用的是ELISA雙抗體夾心法及ELISA間接法。
ELISA試劑盒組成
1. 微孔板 (固相抗體) 96 well
2. 標記抗體 (30倍濃縮,HRP標記抗體) 0.4 ml
3. 標準品 0.5 ml × 2
4. EIA緩沖液 (1% BSA, 0.05% Tween-20 含有PBS) 30 ml
5. 標記抗體稀釋液 (1% BSA, 0.05% Tween-20 含有PBS) 12 ml
6. 顯色液 (TMB底物液) 15 ml
7. 終止液 (1N硫酸) 12 ml
8. 洗滌緩沖濃縮液 (40倍濃縮,0.05% Tween-20的磷酸緩沖液) 50 ml
ELISA試劑盒檢測范圍和保存條件及有效期
1. 試劑盒保存:2-8℃;
2.有效期:6個月。
ELISA試劑盒注意
1. 正式試驗時,應分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件,待檢樣品應作一式二份,以保證實驗結果的準確性。有時本底較高,說明有非特異性反應,可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。