在臨床檢測中,常常遇到溶血的標本。溶血對ELISA檢測乙肝表面抗原(HBsAg)究竟是否有影響,ELISA試劑盒我公司研究技術人員對標本溶血的原因及其對ELISA檢測乙肝表面抗原的影響進行簡要的討論,隨著生命科學的發展,我公司將以全新的姿態展現在生物科技的行業中,公司將不斷加快產品的創新性,大力提高生物試劑的研發和銷售。
1 標本溶血的原因
溶血可分為體內溶血和體外溶血。體外溶血可由物理因素(抽血時負壓過大、水浴溫渡過高、冰凍、振蕩等機械性破壞)、化學因素(血樣接觸表面活性劑)和代謝因素(如遺傳病引起紅細胞脆性增加)引起。在臨床上常見的引起標本溶血的原因包括:因為病人嚴峻脫水、低血容量休克等原因導致穿刺難題造成的溶血;因為抽血用具質量分歧格如真空管負壓不夠或塑料試管質量較差導致的溶血;用干燥管采血為了盡快分離血清用竹簽攪拌不當引起的溶血等。體內溶血可由物理因素(如人工心臟瓣膜或大血管手術后)、化學因素(如惡性瘧)和藥物毒性反應等因素引起。
2 標本溶血對乙肝表面抗原檢測的影響
在17例溶血標本中,初檢的5例HBsAg陽性標本,經重新抽血復檢后有2例仍為陽性,另3例轉陰。20例HBsAg陰性和10例OD值在臨界值四周的樣本,溶血與對應非溶血標本OD值間差異沒有明顯性:10例HBsAg陽性樣品,溶血標本OD值顯著大于對應非溶血標本OD值。ELISA試劑盒以為是溶血導致了假陽性的泛起。對20例HBsAg陰性和10例HBsAg陽性病人的溶血和非溶血標本包括10例OD值在臨界值四周的標本進行了對照,結果非溶血和溶血標本的陰、陽性結果*一致。
一些研究沒有發現標本溶血對HBsAg檢測的影響。對HBˉsAg強陽性樣品的非溶血與溶血(Hb濃度為241g/L)標本的A值作了對照后未發現兩者有統計學差異,得出結論:溶血對HBsAg的檢測沒有影響(嚴格意義上應表述為:溶血對HBsAg強陽性標本的檢測沒有影響)。
3 標本溶血對乙肝表面抗原檢測影響的可能機制
溶血對ELISA試劑盒的影響主要是反應孔對溶血血清中Hb的非特異性吸附和溶血時細胞內液對血清的稀釋作用,溶血是因為各種原因造成紅細胞破壞,胞內血紅蛋白(Hb)等物質和細胞內液進入血清。Hb具有類過氧化物酶活性,其作用與辣根過氧化物酶類似,假如反應孔非特異吸附Hb而殘留,則可催化底物顯色,使本底A值升高甚至造成假陽性。ELISA試劑盒總之,溶血對ELISA檢測HBsAg有一定的影響,影響的性質及其大小因所使用的試劑、測定方法、標本HBsAg的有無及濃度高低、洗板的質量好壞而異。