ELISA試劑盒的實驗操作所要求的條件是比較嚴格的,無論是對實驗的硬件條件還是對實驗的操作人員的技術要求,都是如此。今天上海通蔚就為大家介紹ELISA實驗操作過程中需要注意的這些檢測要點;
1)仔細閱讀說明書 確定試劑盒在有效期內,按說明書確定所有試劑齊全,以及所有實驗額外所需物品,如試管、吸頭、移液器、離心機等。
2)標本制備要規范,每份標本體積要按2-3個復孔以上的量制備(貯存),盡量分裝做備份,短期內無法實驗者,注意低溫保存。
3)按說明書將所用試劑平衡至室溫,配制所需試劑,選擇抗體時選擇一個單抗和一個多抗進行配對;若選擇兩個單抗,必須識別不同表位的抗體;從同一家公司選擇抗體。
4)一般待測抗原標準曲線的線性范圍的可通過將標準品做8次2倍系列稀釋從2000pg/ml到15pg/ml,可利用標準的ELISA試劑盒操作流程、放大試劑盒、第三類試劑、或改變酶底物系統可在一定范圍內提高靈敏度。